Kit ForeDirect RT-qPCR
Katrangan
Kit ForeDirect RT-qPCR dirancang kanggo amplifikasi wektu nyata RNA langsung saka koleksi swab tanpa proses pemurnian RNA.Kit iki ngrampungake siklus qRT-PCR sajrone sejam.Campuran enzim minangka campuran optimal saka Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, inhibitor RNase.Buffer Reaksi ngemot kabeh komponen sing dibutuhake, kalebu komponen buffer sing dioptimalake, Mg2+, dUTP, lan dNTPs.
Spesifikasi
100T
Komponen kit
Agen rilis asam nukleat |
Proteksi RNA |
2 × RT-qPCR Buffer |
Campuran Enzim (Taq&M-MLV) |
instruksi |
Aplikasi PCR
1. Sawise tabung reaksi PCR wis centrifuged sedhela, sijine ing tank sampel instrument amplifikasi.
2. Protokol termal
Langkah | Suhu | Wektu | Siklus | |
1 | Transkripsi mbalikke | 50 ℃ | 15 min | 1 |
2 | Pra-denaturasi | 95 ℃ | 1 min | 1 |
3 | Denaturasi | 95 ℃ | 10 detik | 42 |
4 | Anneal / Extension | 60 ℃ | 30 detik |
Cathetan:Sinyal neon dideteksi sanalika sawise langkah extension saben siklus.
3. Sawise nyetel, nyimpen file lan mbukak program reaksi.
Langkah-langkah Operasi
Sadurunge nyiapake reagen, kabeh reagen ing kit kudu dicairake ing suhu kamar lan dicampur alon-alon.
Persiapan reagen
1. Siapke Nucleic Acid Release Mix
Komponen | Volume saben Sampel utawa Kontrol |
Agen rilis asam nukleat | 5 μL |
Proteksi RNA | 0,5 μL |
2. Siapke Campuran Reaksi
Komponen | Volume saben Sampel utawa Kontrol |
2 × RT-qPCR Buffer | 15 μL |
Campuran Enzim (Taq&M-MLV) | 1,5 μl |
Primer lan Probe | 1 μL |
Panyimpenan lan urip beting
- Kit kudu disimpen ing -20± 5℃.Periode validitas 12 sasi.
- Nyingkiri siklus beku-thaw bola-bali (<5 siklus).