Kit Isolasi RNA Total Pabrik Kit Purificaiton RNA Total kanggo Tanduran Kurang Polisakarida lan Polifenol
Spesifikasi
50 Preps, 200 Preps
Kit kasebut nggunakake kolom spin lan rumus sing dikembangake dening Foregene, sing bisa ngekstrak RNA total kanthi kemurnian lan kualitas dhuwur saka macem-macem jaringan tanduran kanthi kandungan polisakarida lan polifenol sing sithik.Kanggo conto tanduran kanthi kandungan polisakarida utawa polifenol sing dhuwur, disaranake nggunakake Plant Total RNA Isolation Plus Kit kanggo entuk asil ekstraksi RNA sing luwih apik.Kit nyedhiyakake kolom DNA-Cleaning sing bisa kanthi gampang mbusak DNA genom saka supernatant lan lisat jaringan.Kolom RNA mung bisa ngiket RNA kanthi efektif.Kit kasebut bisa ngolah pirang-pirang conto ing wektu sing padha.
Kabeh sistem ora ngemot RNase, mula RNA sing wis diresiki ora bakal rusak.Buffer PRW1 lan Buffer PRW2 bisa njamin yen RNA sing dipikolehi ora kena kontaminasi protein, DNA, ion, lan senyawa organik.
Komponen kit
| Buffer PSL1, Buffer PS, Buffer PSL2 |
| Buffer PRW1, Buffer PRW2 |
| ddH Bebas RNase2O, Kolom Pembersihan DNA |
| RNA-Mung Column |
| instruksi |
Fitur & kaluwihan
■ Operasi ing suhu kamar (15-25 ℃) saindhenging kabèh proses, tanpa perlu es lan centrifugation suhu kurang.
■ Kit Lengkap RNase-Free, ora perlu kuwatir bab degradasi RNA.
■ DNA-Cleaning Column khusus ngiket DNA, supaya kit bisa mbusak kontaminasi DNA genomik tanpa nambah DNase.
■ Ngasilake RNA dhuwur: Kolom mung RNA lan formula unik bisa ngresiki RNA kanthi efisien.
■ Kacepetan cepet: gampang dioperasi lan bisa rampung sajrone 30 menit.
■ Keamanan: ora ana reagen organik sing dibutuhake.
■ Kualitas dhuwur: Fragmen RNA sing diresiki nduweni kemurnian dhuwur, bebas saka protein lan impurities liyane, lan bisa ketemu macem-macem aplikasi eksperimen hilir.
Aplikasi kit
Cocog kanggo ekstraksi lan pemurnian total RNA saka conto jaringan tanduran seger utawa beku (utamane jaringan godhong tanduran seger) kanthi kandungan polisakarida lan polifenol sing sithik.
Aliran kerja
Diagram
Plant Total RNA Isolation Kit Plus ngolah 50mg godhong seger saka polisakarida lan polifenol, lan 5% RNA dimurnèkaké diuji kanthi elektroforesis.
1: gedhang
2: Ginggo
3: Katun
4: pomegranate
Panyimpenan lan urip beting
Kit bisa disimpen kanggo 12 sasi ing suhu kamar (15-25 ℃) ing lingkungan garing, lan 2-8 ℃ kanggo wektu maneh (24 sasi).
Buffer PSL1 bisa disimpen ing 4 ℃ kanggo 1 sasi sawise nambah 2-hydroxy-1-ethanethiol (opsional).
Panduan Analisis Masalah
Analisis ing ngisor iki babagan masalah sing bisa sampeyan temoniTanduran TotalRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.
Kolom spin macet
Pemblokiran kolom spin bakal nyebabake asil RNA suda utawa malah ora bisa diresiki kanggo entuk RNA, lan kualitas RNA sing dipikolehi bakal kurang.
Analisis Penyebab Umum:
1. Sampel ora rusak rampung.
Fragmentasi sampel sing ora lengkap bisa ngalangi Kolom Pembersihan DNA, sing uga bisa mengaruhi asil lan kualitas RNA.Disaranake nalika nindakake fragmentasi sampel, cepet tlatah kanthi jumlah nitrogen cair sing cukup kanggo ngrusak jaringan kayata tembok sel lan membran sel sampel sabisa-bisa.Kanggo conto tanduran polyphenol polysaccharides, disaranake sampeyan nggunakake Plant Total RNA Isolation Kit Plus.
2. Aspirate DNA-Cleaning Column terisolasi supernatant, aspirate bisa sel puing pelet.
Pelet puing sel sing disedot bisa nyumbat Kolom mung RNA sajrone prosedur adsorpsi RNA (pirsani langkah 5 prosedur, langkah 6 saka prosedur polifenol polisakarida).Disaranake supaya ati-ati kudu ditindakake nalika nyedhot supernatan iki supaya ora ana lebu sel sing disedot.
3. Jumlah awal sampel gedhe banget.
Panggunaan sampel sing berlebihan bakal nyebabake fragmentasi sampel sing ora lengkap utawa lisis sel sing ora lengkap dening Buffer PRL1 utawa Buffer PSL1, sing nyebabake kolom pemurnian sing macet kanggo operasi pemurnian.Kit Isolasi RNA Total Tanduran nduweni maksimum wiwitan 50 mg saben pemurnian siji sampel sing dioperasi.Kanggo conto tanduran polyphenol polysaccharides, disaranake sampeyan nyoba Plant Total RNA Isolation Kit Plus.
4. Suhu centrifuge kurang banget.
Isolasi lan purifikasi RNA sakabehe kajaba gangguan nitrogen cair saka jaringan sampel, kabeh langkah ditindakake ing suhu kamar (20-25 °C).Sawetara centrifuge suhu rendah duwe suhu ngisor 20 °C, sing bisa nyebabake sumbatan ing Kolom Pembersihan DNA lan/utawa Kolom mung RNA.Yen kedadeyan kasebut, atur suhu centrifuge dadi 20-25 °C lan pre-anget campuran lisis lan/utawa tambahan supernatan pemisah etanol dadi 37 °C.
Ora ana RNA sing diekstrak utawa ngasilake RNA kurang
Biasane akeh faktor sing mengaruhi efisiensi pemulihan, kayata: konten sampel RNA, metode operasi, volume elusi, lsp.
Analisis sabab umum kaya ing ngisor iki:
1.Adus es utawa sentrifugasi suhu kurang (4°C) ditindakake sajrone operasi kasebut.
Saran: Operasi ing suhu kamar (15-25 ° C) ing kabeh proses, aja nglakoni adus es lan sentrifugasi suhu rendah.
2.RNA wis rusak amarga pengawetan sampel sing ora bener utawa pengawetan sampel kanggo jangka panjang.
Rekomendasi: Sampel sing anyar diklumpukake kudu cepet beku ing nitrogen cair, lan banjur disimpen ing -80 ° C kanggo dangu, supaya bola beku lan thawing saka conto;utawa langsung rendhem conto ing larutan RNA stabilizer RNAlater (conto kewan).
3.Fragmentasi sampel lan lisis sing ora cukup nyebabake penyumbatan kolom pemurnian.
Saran: Nalika nggiling jaringan, priksa manawa jaringan wis cukup lemah, lan cepet pindhah menyang Buffer PSL1 sing wis disiapake (konfirmasi yen proporsi β-ME sing bener wis ditambahake, deleng langkah 1 saka prosedur).
4. Eluent ditambahake salah.
Saran: Priksa manawa RNase-Free ddH2O netes ing tengah membran kolom pemurnian.
5.Volume bener saka etanol Absolute iki ora ditambahake menyang Buffer PSL2 utawa Buffer PRW2.
Saran: Tututi pandhuane, tambahake volume etanol absolut sing bener menyang Buffer PSL2 lan Buffer PRW2 lan aduk kanthi becik sadurunge kit digunakake.
6. Jumlah sampel jaringan ora cocog.
Saran: Gunakake 50 mg jaringan saben 500 μl Buffer PSL1.Nggunakake jaringan sing akeh banget bakal nyuda jumlah RNA sing diekstrak lan kemurnian RNA sing diasilake uga bakal suda.Disaranake supaya dosis sampel awal ora ngluwihi 50 mg saben operasi ekstraksi RNA.
7. Volume elusi sing ora cocog utawa elusi sing ora lengkap.
Saran: Volume eluen kolom pemurnian yaiku 50-200 μl;yen efek elusi ora marem, disaranake kanggo ngluwihi wektu ing suhu kamar sawise nambah preheated RNase-Free ddH2O, kayata 5-10 min.
8.Kolom pemurnian nduweni residu etanol sawise dicuci nganggo Buffer PRW2.
Saran: Yen tabung kosong wis centrifuged kanggo 1 min lan isih ana etanol isih sawise ngumbah ing Buffer PRW2, sampeyan bisa nambah wektu centrifugation tabung kosong kanggo 2 min, utawa nyeleh kolom dimurnèkaké ing suhu kamar kanggo 5 min kanggo kebak mbusak etanol ampas.
9. Kit iki digunakake salah.
Saran: Kanggo conto tanduran polisakarida polifenolik, nggunakake kit umum kayata Kit Isolasi RNA Total Tanduran bisa uga ora bisa njupuk conto RNA sing cocog.Disaranake sampeyan nggunakake Plant Total RNA IsolationKit Plus, sing dirancang khusus kanggo conto tanduran polyphenolic polysaccharide.Kit sing dikembangake khusus kanggo ngekstrak RNA saka conto tanduran polifenol lan polisakarida.
Nilai OD260/OD280 kurang
Elusi RNA karo ddH2O lan digunakake kanggo maca spektrofotometer ngasilake nilai OD260/OD280 sing kurang.Disaranake nggunakake 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (tinimbang RNase-Free ddH2O kanggo elute RNA) kanggo entuk nilai OD260/OD280 sing relatif bener, deleng "Konsentrasi RNA lan Pengujian Pemurnian" ing kaca 19.
RNA sing diresiki didegradasi
Kualitas RNA sing diresiki ana gandhengane karo faktor kayata pengawetan sampel, kontaminasi RNase, lan manipulasi.
Analisis sabab umum:
1.Sampel jaringan ora disimpen ing wektu sawise koleksi.
Rekomendasi: Yen conto tissue ora digunakake ing wektu sawise koleksi, mangga simpen ing nitrogen Cairan ing suhu kurang langsung utawa transfer menyang -80 ° C kanggo panyimpenan long-term sawise beku cepet ing nitrogen Cairan, utawa langsung kacemplungaken conto ing RNA stabilizer solusi RNAlater (conto kewan ).Kanggo ekstraksi RNA, coba gunakake conto jaringan sing anyar diklumpukake.
2. Pembekuan lan thawing sampel jaringan sing bola-bali.
Saran: Nalika nyimpen conto jaringan, luwih becik dipotong dadi potongan-potongan cilik kanggo pengawetan, lan njupuk bagean kasebut nalika digunakake kanggo ngindhari degradasi RNA sing disebabake dening pembekuan lan pencairan sing bola-bali.
3. RNase dikenalake ing kamar operasi utawa ora nganggo sarung tangan, topeng, lsp.
Saran: Eksperimen ekstraksi RNA paling apik ditindakake ing operasi RNA sing kapisah, lan meja laboratorium kudu diresiki sadurunge eksperimen, lan sarung tangan lan topeng sing bisa digunakake sajrone eksperimen supaya ora ana degradasi RNA sing disebabake dening introduksi RNase nganti paling gedhe.
4.Reagen wis ono racune dening RNase sak nggunakake.
Saran: Ganti karo seri anyar kit ekstraksi RNA total tanduran kanggo eksperimen sing gegandhengan.
5. Tabung centrifuge lan tip pipette sing digunakake kanggo manipulasi RNA wis kontaminasi karo RNase.
Saran: Priksa manawa tabung centrifuge, tip pipette, pipette, lan sapiturute sing digunakake ing ekstraksi RNA kabeh bebas RNase.
Instruksi Manual:
