Kit Isolasi RNA Total Kewan Kit Ekstraksi lan Pemurnian RNA Total kanggo Jaringan & Sel Kewan
Deskripsi Kit:
Cepet lan efisien extract RNA total kemurnian lan kualitas dhuwur saka macem-macem jaringan kewan.
Ora perlu kuwatir babagan degradasi RNA.Kabeh sistem punika RNase-Free
Mbusak DNA kanthi efektif nggunakake Kolom Pembersihan DNA
Mbusak DNA tanpa nambah DNase
Prasaja-kabeh operasi rampung ing suhu kamar
Cepet-operasi bisa rampung ing 30 menit
Aman-ora ana reagen organik sing digunakake
Kemurnian dhuwur-OD260/280≈1.8-2.1
Katrangan Kit
50 Preps, 200 Preps
Kit iki nggunakakekolom spin lan rumusdikembangake dening perusahaan kita, sing bisa ngekstrak RNA total kemurnian lan kualitas dhuwur saka macem-macem jaringan kewan kanthi efisiensi dhuwur. Nyedhiyakake Kolom Pembersihan DNA sing efisien, sing bisa kanthi gampang misahake lan nyerep DNA genom saka supernatant lan lysate jaringan, prasaja lan ngirit wektu;RNA-mung Column bisa irit ikatan RNA lan bisa diproses bebarengan karo rumus unik Kathah conto.
Kabèh sistem RNase-Free, supaya RNA sing diekstrak ora rusak;Buffer RW1, Buffer RW2 sistem cuci buffer, supaya RNA dijupuk bebas saka protein, DNA, ion, lan polusi senyawa organik.
Komponen kit
| Kit Isolasi RNA Total Kewan | ||
| Komponen kit | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 T | 200 T | |
| Buffer RL1* | 25 ml | 100 ml |
| Buffer RL2 | 15 ml | 60 ml |
| Buffer RW1* | 25 ml | 100 ml |
| Buffer RW2 | 24 ml | 96ml |
| Bebas RNase ddH2O | 10 ml | 40 ml |
| Kolom mung RNA | 50 | 200 |
| Kolom DNA-Cleaning | 50 | 200 |
| Instruksi Manual | 1 bêsik | 1 bêsik |
informasi produk
| Format | Spin kolom | Komponen purifikasi | Kolom foregene, reagen |
| Fluks | 1-24 sampel | Wektu saben prep | ~30 mnt (24 sampel) |
| Centrifuge | Centrifuge meja | Pemisahan pirolisis | Pemisahan sentrifugal |
| Sampel | jaringan kewan;sel | Jumlah sampel | Jaringan: 10-20 mg;Sel:(1-5)×106 |
| Volume elusi | 50-200 μL | Volume loading maksimal | 850 l |
Fitur & kaluwihan
■ Ora perlu kuwatir babagan degradasi RNA;kabèh sistem RNase-Free
■ Èfèktif mbusak DNA-nggunakake DNA-Cleaning Column
■ Mbusak DNA tanpa nambah DNase
■ Prasaja-kabeh operasi rampung ing suhu kamar
■ Fast -operasi bisa rampung ing 30 menit
■ Aman-ora ana reagen organik sing dibutuhake
■ Kemurnian dhuwur -OD260/280≈1.8-2.1
Aplikasi kit
Cocog kanggo ekstraksi lan pemurnian total RNA saka macem-macem jaringan kewan seger utawa beku utawa sel kultur.
Parameter produk
■ Aplikasi hilir: sintesis cDNA untaian pertama, RT-PCR, kloning molekuler, Northern Blot, lsp.
■ Sampel: jaringan kewan, sel kultur
■ Dosis: Jaringan 10-20mg, Sel(2-5)×106
■ Kapasitas pengikat DNA maksimum kolom pemurnian: 80 μg
■ Volume elusi: 50-200 μl
Diagram
Kit Isolasi RNA Total Kewan sing diobati 20mg
Sampel tikus seger, njupuk 5% total RNA 1% agar
Elektroforesis glikogel
1: limpa 2: ginjel
3: Ati 4: Jantung
Panyimpenan lan urip beting
Kit bisa disimpen nganti 24 sasi ing suhu kamar (15-25 ℃) utawa 2-8 ℃ kanggo wektu sing luwih suwe.Buffer RL1 bisa disimpen ing suhu 4 ℃ suwene 1 sasi sawise ditambahake β-mercapptoethanol (opsional).
Artikel sing dikutip
1.Yen: 18.808:Zheng, Q., Qin, F., Luo, R., et al.Nanopartikel Kaya Lipid sing Dimuat mRNA kanggo Penyuntingan Dasar Ati Liwat Optimasi Desain Komposit Tengah.Adv.Fungsi.Mater.2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.Yen: 18.187:He X, Hong W, Yang J, et al.Apoptosis sel spontan ing persiapan sel induk terapeutik nduwe efek imunomodulator liwat pelepasan fosfatidilserin.Sinyal Transduct Target Ther.2021 Juli 14;6(1):270.doi: 10.1038 / s41392-021-00688-z.
3.Yen: 17.97:Dai Z, Liu H, Liao J, et al.Modifikasi tRNA N7-Methylguanosine ningkatake terjemahan mRNA onkogenik lan ningkatake perkembangan kolangiokarsinoma intrahepatik.Sel Mol.2021 Jul 29:S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.Yen: 9.225: Cao X, Shu Y, Chen Y, et al.Modifikasi m6A Mettl14-Mediated Nggampangake Regenerasi Ati kanthi Njaga Homeostasis Retikulum Endoplasma.Sel Mol Gastroenterol Hepatol.2021;12(2):633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
Kit isoaltion RNA kanggo sumber sampel liyanekasedhiya:
Sel, tanduran, virus, getih, lsp.
RNA ora diekstrak utawa ngasilake RNA kurang
Asring ana macem-macem faktor sing mengaruhi efisiensi pemulihan, kayata: isi RNA sampel jaringan, cara operasi, volume elusi, lsp.
1. Adus es utawa cryogenic (4 ° C) centrifugation ditindakake sajrone operasi.
Rekomendasi: Operasi ing suhu kamar (15-25 ° C) ing kabeh proses, aja adus es lan centrifuge ing suhu sing kurang.
2. Pengawetan sampel sing ora bener utawa wektu panyimpenan sampel sing berlebihan.
Rekomendasi: Simpen conto ing -80 °C utawa beku ing nitrogen cair lan aja nggunakake beku-thaw bola-bali;coba gunakake jaringan seger utawa sel kultur kanggo ekstraksi RNA.
3. Lisis sampel ora cukup.
Rekomendasi: Nalika nggawe homogenisasi jaringan, priksa manawa jaringan kasebut cukup homogenisasi lan sel-sel jaringan cukup pamisah kanggo nerangake pelepasan RNA.
4. Eluent ora ditambahake kanthi bener.
Rekomendasi: Konfirmasi yen RNase-Free ddH2O ditambahake dropwise menyang tengah membran kolom pemurnian.
5. Volume bener etanol Absolute iki ora ditambahake menyang Buffer RL2 utawa Buffer RW2.
Rekomendasi: Tindakake pandhuane, tambahake volume etanol absolut sing bener menyang Buffer RL2 lan Buffer RW2 lan aduk kanthi becik sadurunge nggunakake kit.
6. Dosis sampel jaringan ora cocog.
Rekomendasi: Gunakake 10-20 mg tissue utawa (1-5) × 106sel saben 500 μl buffer RL1, amarga panggunaan jaringan sing berlebihan bisa nyebabake ekstraksi RNA suda.
7. Volume elusi sing ora bener utawa elusi sing ora lengkap.
Rekomendasi: Volume elusi kolom pemurnian yaiku 50-200 μl;yen efek elusi ora marem, disaranake kanggo ngluwihi wektu panggonan suhu kamar sawise nambah preheated RNase-Free ddH2O, contone kanggo 5-10 min.
8.Kolom pemurnian wis turahan etanol sawise Buffer RW2 wisuh.
Rekomendasi: Yen ana residu etanol sawise ngumbah Buffer RW2, centrifugation tabung kosong kanggo 1min, wektu kanggo operasi centrifugation tabung kosong bisa tambah kanggo 2min, utawa kolom dimurnèkaké bisa diselehake ing suhu kamar kanggo 5 min kanggo nyukupi mbusak etanol ampas.
RNA sing diresiki didegradasi
Kualitas RNA sing diresiki ana gandhengane karo faktor kayata pengawetan sampel, kontaminasi RNase, lan manipulasi, lsp.
1. Sampel jaringan ora disimpen ing wektu.
Rekomendasi: Yen sampel jaringan utawa sel ora digunakake ing wektu pas wektune sawise koleksi, langsung cryopreserve ing -80 °C utawa nitrogen cair.Kanggo ngekstrak RNA, gunakake sampel jaringan utawa sel sing mentas dijupuk yen bisa.
2. bola-bali beku-thawing saka tissue sampel.
Rekomendasi: Nalika nyimpen conto tissue, iku paling apik kanggo Cut menyang bêsik cilik kanggo pengawetan, lan mbusak siji saka bêsik nalika digunakake kanggo supaya bola beku-thawing saka sampel lan degradasi RNA.
3. RNase dikenalake utawa ora nganggo sarung tangan, topeng, lan liya-liyane sajrone operasi.
Rekomendasi: Eksperimen ekstraksi RNA paling apik ditindakake ing kamar manipulasi RNA sing kapisah lan meja diresiki sadurunge eksperimen.
Nganggo sarung tangan lan topeng sing bisa digunakake sajrone eksperimen kanggo nyuda degradasi RNA sing disebabake dening introduksi RNase.
4. Reagen kena kontaminasi RNase nalika digunakake.
Rekomendasi: Ganti karo Kit Isolasi RNA Total Kewan anyar kanggo eksperimen sing gegandhengan.
5. Tabung centrifuge, tips, lan liya-liyane sing digunakake ing manipulasi RNA kena kontaminasi RNase.
Rekomendasi: Konfirmasi yen tabung centrifuge, tips, pipettes, lan sapiturute digunakake ing ekstraksi RNA kabeh RNase-Free.
RNA sing diresiki mengaruhi eksperimen hilir
RNA diresiki dening kolom dimurnèkaké, yen ion uyah, isi protein gedhe banget bakal mengaruhi eksperimen hilir, kayata: mbalikke transkripsi, Northern Blot et al.
1. RNA elusi duwe residu ion uyah.
Rekomendasi: Konfirmasi yen volume etanol sing bener wis ditambahake menyang Buffer RW2 lan nindakake 2 washes kolom pemurnian ing kacepetan centrifugal sing dituduhake kanggo operasi;yen ana sisa ion uyah, ninggalake kolom pemurnian kanggo Buffer RW2 kanggo 5 menit ing suhu kamar lan nindakake centrifugation kanggo nggedhekake aman saka kontaminasi uyah.
2. Ampas etanol ing RNA elusi.
Rekomendasi: Konfirmasi yen sawise ngumbah buffer RW2, nindakake operasi centrifugation tabung kosong ing kacepetan centrifugation sing dituduhake kanggo operasi, nambah wektu operasi centrifugation tabung kosong nganti 2 min yen isih ana residu etanol, utawa ninggalake ing suhu kamar kanggo 5 menit sawise centrifugation tabung kosong kanggo nggedhekake aman saka turahan etanol.
