Kit RT-qPCR langsung
Deskripsi Kit:
◮ Direct RT-qPCR Kit, nggunakake Foreasy Reverse Transcriptase lan Foreasy HS Taq DNA Polymerase ngembangaken dening Foregene, karo reaksi buffer unik, ndadekake kit iki resistance kuwat lan kompatibilitas, lan bisa langsung test reaksi nggunakake sistem Foregene Lysis minangka cithakan.Kit iki bisa ditrapake kanggo kit deteksi asam nukleat COVID-19 lan pangembangan kit deteksi asam nukleat bakteri patogen liyane.
Katrangan
Kit RT-qPCR langsung nyedhiyakake buffer RT-qPCR sing dikemas kapisah lan enzim efisien dhuwurcampuran (Taq, M-MLV, RI), nggawe trep kanggo nggawe kit lan sistem mburi mburi.pangaturan, ing verifikasi prasaja.
Spesifikasi
500T, 50.000T
Komponen kit
| Isi kit (20 μL sistem reaksi) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Campuran Enzim Langsung | 500 μL× 1 | 50 ml× 1 |
| 2× Langsung RT-qPCR Buffer | 1 ml×5 | 500 ml× 1 |
| instruksi | 1 | 1 |
Langkah-langkah Operasi
Sadurunge nyiapake reagen, kabeh reagen ing kit kudu dicairake ing suhu kamar lan dicampur alon-alon.
A: Siapke of cithakan lan reagen
1. Siapke cithakan RNA disiapake (Disaranake nggunakake Foregene Total RNA Isolation Kit seri kit kanggo extract lan ngresiki cithakan RNA) utawa sampel produk cracking (Disaranake nggunakake sistem Foregene Lysis), primers tartamtu (10 μM) lan consumables cocog liyane, instrument.
2. Lebokake 2 × Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O lan 20 × ROX Reference Dye (yen's needed) ing kothak karo es, nggawe iki nyawiji alamiah, lan dicampur alon-alon.
B: Siapke of RT-qPCR sistem
Tabel 1 : Siapke of RT-qPCR system
| Komponen | Volume | Konsentrasi pungkasan |
| 2× Langsung RT-qPCR Buffer | 10 μL | 1× |
| Campuran Enzim Langsung | 1μL | |
| Primer Maju (10 μM) | 0,8 l | 50-900nM |
| Primer Mundur (10 μM) | 0,8 l | 50-900nM |
| Probe (4 μM) | 1μL | 200nM |
| Cithakan (RNA utawa Lysate) | X μL | |
| 20 × ROX Referensi Pewarna | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Volume Total | 20μL |
C: Set ing RT-qPCR reaksi program
Tabel 2 : RT-qPCR reaksion program setelan (kanggo contone: kalih-langkah cara)
| Langkah | Suhu | Wektu | Siklus | Isi | |
| 1 | 50 ℃ | 15 min | 1* | 1 | Transkripsi mbalikke |
| 2 | 95 ℃ | 1 min | 1 | Pra-denaturasi | |
| 3 | 95 ℃ | 10 sek | 40-45 | Denaturasi | |
| 60 ℃ | 30 detik 2* | Anneal / Extension | |||
Panyimpenan lan urip beting
- Kit kudu disimpen ing -20± 5℃.Periode validitas 12 sasi.
- Nyingkiri siklus beku-thaw bola-bali (<5 siklus).
