FAQ kanggoKit Isolasi RNA Total Hewan

Analisis ing ngisor iki babagan masalah sing bisa sampeyan temoniekstraksi RNA jaringan/sel hewan will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

RNA ora diekstrak utawa ngasilake RNA kurang

Asring ana macem-macem faktor sing mengaruhi efisiensi pemulihan, kayata: isi RNA sampel jaringan, cara operasi, volume elusi, lsp.

1. Adus es utawa cryogenic (4 ° C) centrifugation ditindakake sajrone operasi.

Rekomendasi: Operasi ing suhu kamar (15-25 ° C) ing kabeh proses, aja adus es lan centrifuge ing suhu sing kurang.

2. Pengawetan sampel sing ora bener utawa wektu panyimpenan sampel sing berlebihan.

Rekomendasi: Simpen conto ing -80 °C utawa beku ing nitrogen cair lan aja nggunakake beku-thaw bola-bali;coba gunakake jaringan seger utawa sel kultur kanggo ekstraksi RNA.

3. Lisis sampel ora cukup.

Rekomendasi: Nalika nggawe homogenisasi jaringan, priksa manawa jaringan kasebut cukup homogenisasi lan sel-sel jaringan cukup pamisah kanggo nerangake pelepasan RNA.

4. Eluent ora ditambahake kanthi bener.

Rekomendasi: Konfirmasi yen RNase-Free ddH₂O ditambahake dropwise menyang tengah membran kolom pemurnian.

5. Volume bener etanol Absolute iki ora ditambahake menyang Buffer RL2 utawa Buffer RW2.

Rekomendasi: Tindakake pandhuane, tambahake volume etanol absolut sing bener menyang Buffer RL2 lan Buffer RW2 lan aduk kanthi becik sadurunge nggunakake kit.

6. Dosis sampel jaringan ora cocog.

Rekomendasi: Gunakake 10-20 mg tissue utawa (1-5) × 10⁶sel saben 500 μl buffer RL1, amarga panggunaan jaringan sing berlebihan bisa nyebabake ekstraksi RNA suda.

7. Volume elusi sing ora bener utawa elusi sing ora lengkap.

Rekomendasi: Volume elusi kolom pemurnian yaiku 50-200 μl;yen efek elusi ora marem, disaranake kanggo ngluwihi wektu panggonan suhu kamar sawise nambah preheated RNase-Free ddH₂O, contone kanggo 5-10 min.

8.Kolom pemurnian wis turahan etanol sawise Buffer RW2 wisuh.

Rekomendasi: Yen ana residu etanol sawise ngumbah Buffer RW2, centrifugation tabung kosong kanggo 1min, wektu kanggo operasi centrifugation tabung kosong bisa tambah kanggo 2min, utawa kolom dimurnèkaké bisa diselehake ing suhu kamar kanggo 5 min kanggo nyukupi mbusak etanol ampas.

RNA sing diresiki didegradasi

Kualitas RNA sing diresiki ana gandhengane karo faktor kayata pengawetan sampel, kontaminasi RNase, lan manipulasi, lsp.

1. Sampel jaringan ora disimpen ing wektu.

Rekomendasi: Yen sampel jaringan utawa sel ora digunakake ing wektu pas wektune sawise koleksi, langsung cryopreserve ing -80 °C utawa nitrogen cair.Kanggo ngekstrak RNA, gunakake sampel jaringan utawa sel sing mentas dijupuk yen bisa.

2. bola-bali beku-thawing saka tissue sampel.

Rekomendasi: Nalika nyimpen conto tissue, iku paling apik kanggo Cut menyang bêsik cilik kanggo pengawetan, lan mbusak siji saka bêsik nalika digunakake kanggo supaya bola beku-thawing saka sampel lan degradasi RNA.

3. RNase dikenalake utawa ora nganggo sarung tangan, topeng, lan liya-liyane sajrone operasi.

Rekomendasi: Eksperimen ekstraksi RNA paling apik ditindakake ing kamar manipulasi RNA sing kapisah lan meja diresiki sadurunge eksperimen.

Nganggo sarung tangan lan topeng sing bisa digunakake sajrone eksperimen kanggo nyuda degradasi RNA sing disebabake dening introduksi RNase.

4. Reagen kena kontaminasi RNase nalika digunakake.

Rekomendasi: Ganti karo Kit Isolasi RNA Total Kewan anyar kanggo eksperimen sing gegandhengan.

5. Tabung centrifuge, tips, lan liya-liyane sing digunakake ing manipulasi RNA kena kontaminasi RNase.

Rekomendasi: Konfirmasi yen tabung centrifuge, tips, pipettes, lan sapiturute digunakake ing ekstraksi RNA kabeh RNase-Free.

RNA sing diresiki mengaruhi eksperimen hilir

RNA diresiki dening kolom dimurnèkaké, yen ion uyah, isi protein gedhe banget bakal mengaruhi eksperimen hilir, kayata: mbalikke transkripsi, Northern Blot et al.

1. RNA elusi duwe residu ion uyah.

Rekomendasi: Konfirmasi yen volume etanol sing bener wis ditambahake menyang Buffer RW2 lan nindakake 2 washes kolom pemurnian ing kacepetan centrifugal sing dituduhake kanggo operasi;yen ana sisa ion uyah, ninggalake kolom pemurnian kanggo Buffer RW2 kanggo 5 menit ing suhu kamar lan nindakake centrifugation kanggo nggedhekake aman saka kontaminasi uyah.

2. Ampas etanol ing RNA elusi.

Rekomendasi: Konfirmasi yen sawise ngumbah buffer RW2, nindakake operasi centrifugation tabung kosong ing kacepetan centrifugation sing dituduhake kanggo operasi, nambah wektu operasi centrifugation tabung kosong nganti 2 min yen isih ana residu etanol, utawa ninggalake ing suhu kamar kanggo 5 menit sawise centrifugation tabung kosong kanggo nggedhekake aman saka turahan etanol.

Isolasi jinis sampel asam nulceic

Kit Isolasi RNA Foregene bisa entuk total isolasi/ekstraksi RNA saka sampel ing ngisor iki: Jaringan kewan, tanduran, sel, virus, getih, lsp.

Carane nyimpen kit

panyimpenan suhu kamar kanggo 24 sasi.