Antibodi, uga disebut immunoglobulin (Ig), yaiku glikoprotein sing khusus ngiket antigen.
 
Preparasi antibodi konvensional diprodhuksi dening imunisasi kewan lan ngumpulake antiserum.Mulane, antiserum biasane ngandhut antibodi marang antigen liyane sing ora ana hubungane lan komponen protein liyane ing serum.Molekul antigen umum biasane ngemot pirang-pirang epitope sing beda-beda, mula antibodi konvensional uga minangka campuran antibodi marang macem-macem epitop.Malah antibodi serum konvensional sing diarahake marang epitope sing padha isih dumadi saka antibodi heterogen sing diprodhuksi dening klon sel B sing beda.Mulane, antibodi serum konvensional uga disebut antibodi poliklonal, utawa antibodi poliklonal kanggo cendhak.
 
Antibodi monoklonal (antibodi monoklonal) yaiku antibodi sing seragam banget sing diprodhuksi dening klon sel B tunggal lan mung diarahake marang epitope tartamtu.Biasane disiapake kanthi teknologi hibridoma-teknologi antibodi hibridoma adhedhasar teknologi fusi sel, nggabungake sel B kanthi kemampuan kanggo ngetokake antibodi spesifik lan sel myeloma kanthi kapasitas pertumbuhan tanpa wates dadi hibridoma sel B.Sel hibridoma iki nduweni ciri sel induk.Bisa proliferasi tanpa wates lan langgeng ing vitro kaya sel myeloma, lan bisa nyintesis lan ngetokake antibodi spesifik kaya limfosit splenik.Liwat kloning, garis monoklonal sing asale saka sel hibridoma tunggal, yaiku, garis sel hibridoma, bisa diduweni.Antibodi sing diasilake minangka antibodi sing homogen banget marang penentu antigen sing padha, yaiku antibodi monoklonal.
 
Antibodi ana minangka siji utawa luwih monomer berbentuk Y (yaiku, antibodi monoklonal utawa antibodi poliklonal).Saben monomer wangun Y dumadi saka 4 ranté polipeptida, kalebu rong ranté abot sing padha lan rong ranté cahya sing padha.Rantai ringan lan rantai abot dijenengi miturut bobot molekul.Ndhuwur struktur berbentuk Y yaiku wilayah variabel, yaiku situs pengikat antigen.(Petik saka Detai Konsep Antibodi Bio-Monoklonal)
 
Struktur antibodi
Rantai abot
Ana limang jinis rantai abot mamalia Ig, dijenengi nganggo aksara Yunani α, δ, ε, γ, lan μ.Antibodi sing cocog diarani IgA, IgD, IgE, IgG, lan IgM.Rantai abot sing beda-beda beda karo ukuran lan komposisi.α lan γ ngemot kira-kira 450 asam amino, dene μ lan ε ngemot kira-kira 550 asam amino.
Saben rantai abot nduweni rong wilayah: wilayah konstan lan wilayah variabel.Kabeh antibodi saka jinis sing padha duwe wilayah konstan sing padha, nanging ana beda antarane antibodi saka macem-macem jinis.Wilayah konstan rantai abot γ, α, lan δ kasusun saka telung domain Ig bebarengan, kanthi wilayah engsel kanggo nambah keluwesan;wilayah konstan rantai abot μ lan ε dumadi saka 4 domain Ig.Wilayah variabel saka rantai abot antibodi sing diprodhuksi dening sel B sing beda-beda beda, nanging wilayah variabel antibodi sing diprodhuksi dening sel B sing padha utawa klon sel padha, lan wilayah variabel saben rantai abot kira-kira 110 asam amino., Lan mbentuk domain Ig siji.
 
Rantai cahya
Mung ana rong jinis ranté cahya ing mamalia: jinis lambda lan jinis kappa.Saben rantai cahya nduweni rong domain sing disambung: wilayah konstan lan wilayah variabel.Dawane ranté cahya kira-kira 211~217 asam amino.Rong ranté cahya sing ana ing saben antibodi tansah padha.Kanggo mamalia, rantai cahya ing saben antibodi mung nduweni siji jinis: kappa utawa lambda.Ing sawetara vertebrata ngisor, kayata iwak cartilaginous (iwak rawan) lan iwak balung, jinis rantai cahya liyane kayata jinis iota (iota) uga ditemokake.
 
Segmen Fab lan Fc
Segmen Fc bisa langsung digabung karo enzim utawa pewarna fluoresensi kanggo menehi label antibodi.Iki minangka bagean ing ngendi antibodi rivet ing piring sajrone proses ELISA, lan uga minangka bagean ing ngendi antibodi kapindho diakoni lan kaiket ing immunoprecipitation, immunoblotting lan immunohistochemistry.Antibodi bisa dihidrolisis dadi rong segmen F(ab) lan siji segmen Fc kanthi enzim proteolitik kayata papain, utawa bisa dipecah saka wilayah engsel kanthi pepsin lan dihidrolisis dadi siji segmen F(ab)2 lan siji segmen Fc.Fragmen antibodi IgG kadhangkala migunani banget.Amarga kekurangan segmen Fc, segmen F(ab) ora bakal endapan karo antigen, uga ora bakal ditangkap dening sel imun ing studi in vivo.Amarga pecahan molekul cilik lan kekurangan fungsi salib (amarga kekurangan segmen Fc), segmen Fab biasane digunakake kanggo radiolabeling ing studi fungsional, lan segmen Fc utamane digunakake minangka agen pamblokiran ing pewarnaan histokimia.
 
Wilayah variabel lan konstan
Wilayah variabel (wilayah V) dumunung ing 1/5 utawa 1/4 (ngemot udakara 118 residu asam amino) saka rantai H ing cedhak terminal N lan 1/2 (ngemot sekitar 108-111 residu asam amino) ing cedhak terminal N saka rantai L.Saben wilayah V duwe cincin peptida sing dibentuk dening ikatan disulfida intra-rantai, lan saben cincin peptida ngemot kira-kira 67 nganti 75 residu asam amino.Komposisi lan susunan asam amino ing wilayah V nemtokake spesifik antigen naleni antibodi.Amarga jinis-jinis lan urutan asam amino sing terus-terusan ing wilayah V, macem-macem antibodi kanthi spesifik antigen pengikat sing beda bisa dibentuk.Wilayah V saka rantai L lan rantai H diarani VL lan VH.Ing VL lan VH, komposisi lan urutan asam amino ing sawetara wilayah lokal nduweni variasi sing luwih dhuwur.Wilayah kasebut diarani wilayah hipervariable (HVR).Komposisi asam amino lan susunan bagean non-HVR ing wilayah V relatif konservatif, sing diarani wilayah kerangka.Ana telung wilayah hypervariable ing VL, biasane dumunung ing residu asam amino 24 kanggo 34 lan 89 kanggo 97 mungguh.Telung HVR saka VL lan VH diarani HVR1, HVR2 lan HVR3.Panliten lan analisis difraksi kristal sinar-X mbuktekake manawa wilayah hipervariable pancen minangka papan ikatan antigen antibodi, mula diarani wilayah penentu komplementaritas (CDR).HVR1, HVR2 lan HVR3 saka VL lan VH bisa diarani CDR1, CDR2 lan CDR3.Umume, CDR3 nduweni tingkat hipervariabilitas sing luwih dhuwur.Wilayah hipervariabel uga minangka lokasi utama ing ngendi determinan idiotipik saka molekul Ig ana.Ing sawetara kasus, rantai H nduweni peran sing luwih penting kanggo ngiket antigen.
Wilayah konstan (wilayah C)dumunung ing 3/4 utawa 4/5 (kira-kira saka asam amino 119 nganti terminal C) saka rantai H cedhak terminal C lan 1/2 (ngemot udakara 105 residu asam amino) ing cedhak terminal C saka rantai L.Saben wilayah fungsional saka rantai H ngemot kira-kira 110 residu asam amino, lan ngemot cincin peptida sing kasusun saka 50-60 residu asam amino sing disambungake dening ikatan disulfida.Komposisi lan susunan asam amino ing wilayah iki relatif konstan ing rantai Ig isotype L kewan sing padha lan rantai H sing padha.Sing padha, mung bisa ngiket antigen sing cocog, nanging struktur wilayah C padha, yaiku, duwe antigen sing padha.Antibodi sekunder IgG anti-manungsa jaran (utawa anti-antibodi) bisa digabung karo loro kombinasi antibodi A (IgG) marang eksotoksin sing beda-beda.Iki minangka basis penting kanggo nyiapake antibodi sekunder lan ngetrapake fluorescein, isotop, enzim lan antibodi liyane sing diwenehi label.
 
 
Produk sing gegandhengan:
Kit RT-qPCR Sel Langsung