Apa vaksin mRNA
Vaksin mRNA nransfer RNA menyang sel awak kanggo nyebut lan ngasilake antigen protein sawise modifikasi sing relevan in vitro, saéngga mimpin awak ngasilake respon imun marang antigen, saéngga nambah kapasitas kekebalan awak.[1,3].
Gambar 1: Diagram skematis efek injeksi langsung vaksin mRNA [2]
Klasifikasi vaksin mRNA
Vaksin mRNA dipérang dadi rong jinis:nonreplicatingmRNA lannggedhekake dhewemRNA: mRNA self-amplifying ora mung ngode antigen target, nanging uga ngode replikasi sing mbisakake amplifikasi RNA intraselular lan mekanisme ekspresi protein.Vaksin mRNA non-replikasi mung ngode antigen target lan ngemot wilayah 5'lan 3'untranslated (UTR).Dheweke nyedhiyakake stimulasi lengkap adaptasi lan kakebalan bawaan, yaiku ekspresi antigen in situ lan transmisi sinyal bebaya, lan duwe aplikasi ing ngisor iki.[2,3]
● Bisa menehi stimulasi lengkap adaptasi lan kakebalan bawaan, yaiku ekspresi antigen in situ lan transmisi sinyal bebaya
●Bisa nyebabake respon imun "seimbang", kalebu efektor humoral lan seluler lan memori kekebalan
●Bisa nggabungake antigen sing beda tanpa nambah kerumitan formulasi vaksin
● Peningkatan potensial kekebalan sing terus-terusan bisa digayuh liwat vaksinasi bola-bali, lan ora ana utawa ora ana respon imun kanggo operator
●Vaksin mRNA sing stabil panas bisa nyederhanakake transportasi lan panyimpenan vaksin
Gambar 2: Diagram skematik vaksin mRNA lan mekanisme ekspresi antigen [4]
Fitur vaksin mRNA
Dibandhingake karo vaksin tradisional, vaksin mRNA nduweni proses produksi sing prasaja, kecepatan pangembangan sing cepet, ora perlu kultur sel, lan biaya sing murah.Dibandhingake karo vaksin DNA, vaksin mRNA ora perlu mlebu inti lan ora ana risiko integrasi menyang genom inang.Umur setengah bisa diatur kanthi modifikasi.
Tabel 1: Kaluwihan lan kekurangan vaksin mRNA
|
| Kaluwihan | Kekurangan |
| vaksin mRNA | Riset lan pangembangan kanthi cepet, produksi vaksin mung butuh 40 dina | Micu respon imun sing ora perlu
|
| ketidakstabilan mRNA ing kahanan fisiologis, gampang rusak | Ora bakal nggabungake genom kanggo ngindhari mutasi terapeutik
| |
| Ora perlu sinyal lokalisasi nuklir, transkripsi | Efektivitas nuklir safety isih kudu diverifikasi
|
Gambar 3: Bagan alur produksi lan persiapan vaksin mRNA [4]
Kit Isolasi RNA Viral Foregene
RT-qPCR Gampang (Salah Langkah)
Strategi sing luwih apik kanggo nyiapake vaksin mRNA
Amarga stabilitas mRNA sing kurang, gampang degradasi dening nuklease ing jaringan, efisiensi entri sel sing kurang, lan efisiensi terjemahan sing kurang, cacat kasebut mbatesi aplikasi vaksin mRNA.Efisiensi terjemahan uga nduweni peran sing kritis.Kendaraan pangiriman bisa dipérang dadi vektor virus lan vektor non-virus (kalebu liposom, non-liposom, virus, nanopartikel, lan liya-liyane).Mulane, langkah-langkah perbaikan sing relevan dibutuhake.Ing ngisor iki minangka strategi perbaikan farmakologis kanggo persiapan mRNA[2]
1 Sintesis analog tutup utawa gunakake enzim capping kanggo nyetabilake mRNA lan nambah translasi protein kanthi ikatan karo faktor inisiasi translasi eukariotik 4E (EIF4E)
2 Nyetel unsur ing wilayah 5′-untranslated (UTR) lan 3′-UTR kanggo nyetabilake mRNA lan nambah terjemahan protein
3 Nambah buntut Poly(A) bisa nyetabilake mRNA lan nambah terjemahan protein
4 Nukleosida sing diowahi kanggo nyuda aktivasi kekebalan bawaan lan nambah terjemahan
5 Perawatan karo RNase III lan pemurnian kromatografi cair protein cepet (FPLC) bisa nyuda aktivasi kekebalan lan nambah terjemahan.
6 Ngoptimalake urutan utawa kodon kanggo nambah terjemahan
7 Pangiriman bebarengan faktor wiwitan terjemahan lan cara liya kanggo ngganti terjemahan lan imunogenisitas
Gambar 4: Produksi mRNA transkripsi in vitro (IVT) lan proses perakitan [5]
Preparasi DNA plasmid kanthi skala gedhe
Pemurnian DNA plasmid utamané mbusak rereged kayata RNA, endotoksin DNA bunder mbukak, protein inang lan asam nukleat inang, lan biasane ngowahi plasmid rekombinan dadi E. coli.E. coli ngalami fermentasi kapadhetan dhuwur, banjur pemisahan padat-cair, lan koleksi E. coli.E. coli banjur ngalami lisis alkalin, pamisahan padat-cairan centrifugal lan klarifikasi mikrofiltrasi sawise lisis, ultrafiltrasi lan konsentrasi sawise klarifikasi, lan banjur pemurnian kromatografi.
Pemurnian DNA plasmid:
Foregene Umum Plasmid Mini Kit
【1】苗鹤凡, 郭勇, 江新香.mRNA疫苗研究进展及挑战[J].免疫学杂志, 2016(05):446-449.
【2】Pardi N, Hogan MJ, Porter FW, et al.Vaksin mRNA - jaman anyar ing vaksinologi[J].Nature Reviews Drug Discovery, 2018.
【3】Kramps T., Elbers K. (2017) Pambuka kanggo Vaksin RNA.Ing: Kramps T., Elbers K. (eds) RNA Vaksin.Methods in Molecular Biology, vol 1499. Humana Press, New York, NY.
【4】Maruggi G, Zhang C, Li J, et al.mRNA minangka Teknologi Transformasi kanggo Pengembangan Vaksin kanggo Ngontrol Penyakit Infèksius [J].Terapi Molekuler, 2019.
【5】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, , Nyetel Vaksin mRNA kanggo Ngimbangi Respon Kekebalan Bawaan/Adaptif, Tren ing Pengobatan Molekuler, Volume 26, Edisi 3,2020, Kaca 311-323.
Wektu kirim: Aug-05-2021
