Tes laboratorium diwiwiti kanthi koleksi sampel, lan koleksi sampel sing paling gampang dilalekake.Sing paling penting kanggo koleksi sampel yaiku milih jinis sampel sing bener, nggunakake alat sampling sing cocog, lan nindakake transportasi lan pangolahan sing cukup.

I. Tipe sampel

Jinis sampel umum kaya ing ngisor iki:

Cara sampling bisa ngarujuk marang spesifikasi teknis kanggo ngawasi lingkungan koronavirus anyar ing pasar perdagangan pertanian (bazaar) ":

1. Sampel swab saka swab tenggorokan, tangan, sandhangan lan obyek praktisi liyane: kudu nggunakake solusi pengawetan virus ing tabung sampling virus lan nyusup kanthi lengkap ing swab katun sampling.Lumahing lemah) bola-bali ditrapake lan dibilas luwih saka 3 kali.Ing wektu sing padha, perlu kanggo nindakake sampling disebarake multi-titik ing permukaan obyek sampel.

2. Sampel swab lumahing pangan: Sampel panganan ora bisa diklumpukake langsung.Panganan sing bakal diklumpukake kudu dipisahake kanthi ati-ati lan disimpen ing kantong sampling sing resik sadurunge ngumpulake conto swab.Sampeyan kudu nggunakake solusi pengawetan virus ing tabung sampling virus, sawise kebak soaking swab katun sampling, kanggo bola-bali smear lan mbilas lumahing sampel pangan kanggo diklumpukake luwih saka 3 kaping.Ing wektu sing padha, perlu kanggo nindakake sampling disebarake multi-titik ing permukaan sampel.

3. Sampel limbah: Miturut distribusi sistem got ing pasar, pilih 2-3 lokasi sampling limbah, fokus ing koleksi jaringan pipa internal, arah hilir arah aliran banyu, utawa sambungan karo jaringan pipa kotamadya.Kanggo ngumpulake sampel swab, kacemplungaken ing limbah karo swab kapas sampling supaya adsorb limbah lan mbilas ing tabung sampling luwih saka 3 kaping.Kanggo ngumpulake conto limbah, gunakake botol plastik polietilen kanggo ngumpulake sampel banyu limbah 30-500 ml;kanggo koleksi limbah kanthi volume luwih saka 500 ml, ember plastik polietilen utawa peralatan pengayaan khusus sampel banyu ing situs bisa digunakake.Ing wektu sing padha, perlu kanggo nganakake sampling disebarake multi-titik kanggo lokasi sampling limbah.

4. Sampel kewan: Kanggo kewan urip, swab sampling bisa digunakake kanggo ngumpulake swab lumahing awak, swab oropharyngeal lan swab anal, lan conto ekskresi utawa sekresi uga bisa diklumpukake lan dicathet ing lembar rekaman.Kanggo conto kewan sing wis ngalami skinning, lan liya-liyane, gunakake swab kapas kanggo ngumpulake conto swab permukaan lan rongga awak.Sampeyan kudu nggunakake solusi pengawetan virus ing tabung sampling virus kanggo nyusup swab katun sampling kanthi lengkap, banjur mbaleni aplikasi permukaan sampel panganan sing bakal diklumpukake.Shabu luwih saka 3 kaping.Ing wektu sing padha, perlu kanggo nindakake sampling disebarake multi-titik ing permukaan sampel.

5. Perkakas liyane: wadhah kanggo ngeterake lan ngembangake kewan kayata kandhang utawa tangki iwak.Pisanan, mirsani utawa ngerti jinis kewan tartamtu sing disimpen lan dikembangke ing wadhah, lan ngumpulake conto swab ing tembok njero wadhah utawa conto cairan saka isi kasebut.

6. Nglumpukake conto aerosol ing wilayah ngendi wong ngumpul, wilayah perdagangan lokal kurang ventilated, kantor, lan kamar istirahat.

II. Alat Sampling
1. Tabung koleksi getih
Yen sampeyan kudu nindakake tes asam nukleat lan conto antikoagulan mengko, disaranake nggunakake pembuluh getih vakum sing ngemot antikoagulan EDTA kanggo ngumpulake getih;kanggo conto serum, disaranake nggunakake vakum vakum tanpa antikoagulan.

2. Sampling swab

Disaranake nggunakake swab polipropilena tinimbang swab kalsium alginat utawa swab kanthi kutub kayu, amarga bisa ngemot zat sing mateni virus tartamtu lan nyegah tes PCR.Swabs karo kepala katun ora bisa digunakake, amarga serat katun duwe adsorpsi kuwat saka protein lan ora gampang eluted menyang solusi pengawetan sakteruse.

Ing "Spesifikasi Teknis kanggo Koleksi Campuran 10-in-1 lan Deteksi Asam Nukleat Coronavirus Anyar", jelas ditetepake manawa "swab sampling kudu digawe saka poliester, nilon lan bahan non-katun lan non-kalsium alginat liyane, lan gagang kudu digawe saka bahan non-kayu.Titik putus kira-kira 3cm saka ndhuwur sirah swab, sing gampang pecah.

CDC ing Amerika Serikat uga nyebutake "Gunakake swab serat sintetik mung nganggo batang plastik utawa kawat.Aja nggunakake swab calcium alginate utawa swab kanthi batang kayu,amarga bisa ngemot zat sing mateni sawetara virus lan nyegah tes PCR.

Saiki akeh digunakake yaiku swab nilon steril sing digabungake karo rod plastik.Swab flocking nduweni panyerepan banyu lan tingkat rilis sing luwih apik.Miturut situs sampling sing beda, sirah swab uga duwe ukuran lan serat sing beda.Ketebalan.”

3. Sampel solusi pengawetan transportasi

Solusi pengawetan inaktivasi virus: jumlah konsentrasi uyah guanidine sing cocog lan macem-macem komponen lisis virus bisa langsung lyse virus kanggo ngeculake asam nukleat, mateni RNase lan DNase, lan njamin integritas asam nukleat, sing bisa digunakake kanggo deteksi qPCR sakteruse.Ora bisa digunakake kanggo budidaya virus lan isolasi.

Solusi transportasi lan pengawetan virus: ngandhut uyah, asam amino, vitamin, glukosa lan protein sing dibutuhake kanggo urip virus, sing bisa njaga aktivitas virus.Bisa digunakake kanggo ekstraksi asam nukleat lan deteksi virus ing mangsa ngarep, lan uga bisa digunakake kanggo budidaya lan pamisahan virus.

4. Tabung pengawetan sampel lan tas sampel

Tabung panyimpenan sampel kudu tabung plastik steril kanthi tutup sekrup sing ora nyerep asam nukleat.Saben tabung sampel kudu ditutupi tas sampel kanggo nyegah bocor lan kontaminasi sampel.

III.Bahan sing ngganggu ing sampel

Zat sing ngganggu ing eksperimen PCR

1. interferensi endogen

Bahan sing ana ing conto awak bisa ngganggu deteksi zat liya.

getih:heme (>1mg/ml), hemin (>0,1ng/μl), trigliserida, IgG, lsp;

Urine:Urea (20mM);

bangku:polysaccharides tanduran, cholate;

Tisu:protease, kolagen;

susu: protease, ion kalsium;

Obat-obatan: antibiotik, obat antivirus, hormon, lsp.

liyane.

2. interferensi eksogen

Asalé saka zat sing bisa ngganggu deteksi zat liya ing vitro.Aditif sampel lan zat sing bisa dikontak nalika ngumpulake lan ngolah sampel:

Penyetor tes: gel pemisah serum, wadah koleksi sampel lan stopper karet, kateter, cairan flushing kateter, bubuk sarung tangan, lsp.

Antikoagulan: heparin (>0,1 U/mL), EDTA (>0,5 mM), lsp;

Pelarut organik: isopropanol (>0,1 IU/ml), betaine, dimetil sulfoksida, formamida, gliserin, PEG, lsp;

Disinfektan: alkohol (etanol>1%), aldehida, fenol (fenol>0,2%), peroksida, asam kuat (HCL), alkali kuat (NaOH), lsp;

Deterjen:SDS (>0,005%);

lemah: Humus

Bahan pewarna: Indigo

liyane.

Ing kahanan sampling ruangan sing nyata, kayata ngumpulake conto lingkungan, conto kasebut bisa ngemot macem-macem zat sing ngganggu, lan komposisi zat sing ngganggu ing saben lokasi beda-beda, sing mbutuhake eksperimen interferensi PCR ditindakake miturut kahanan lokal.

IV.Kondisi panyimpenan lan transportasi sampel

Spesimen klinis sing anyar diklumpukake kudu dikirim menyang laboratorium sajrone 2 nganti 4 jam sawise koleksi ing suhu 2 ° C nganti 8 ° C.Simpen ing 4 ℃ sajrone 24 jam.Spesimen sing digunakake kanggo isolasi virus lan deteksi asam nukleat kudu dites sanalika bisa.Spesimen sing bisa diuji sajrone 24 jam bisa disimpen ing suhu 4°C;spesimen sing ora bisa dideteksi sajrone 24 jam kudu disimpen ing -70°C utawa ngisor (yen ora- Simpen ing 70°C ing kulkas ing -20°C).

Ringkesan:Koleksi standar, transportasi lan panyimpenan sampel penting kanggo tes sabanjure.Negatif palsu saka pirang-pirang tes laboratorium disebabake pengumpulan, transportasi lan panyimpenan sampel sing ora bener sing nyebabake degradasi asam nukleat virus.Nanging, akeh laboratorium isih nglirwakake pentinge sampling.Muga-muga artikel iki bisa nggugah manungsa waé kanggo sampling lan nggawe sampling luwih ilmiah lan cukup!

produk sing gegandhengan:

Kit Deteksi Asam Nukleat Varian SARS-CoV-2 (I) (Metode Probe Fluorescent PCR Multiplex)-Kanggo Deteksi Mutan Saka Brasil, Afrika Kidul, Lan Inggris