Pinten sampeyan ngerti

Babagan Nekstraksi asam ukleat

Awal lan pungkasan asam nukleat sing diresiki

Kabeh angel ing wiwitan, asam nukleat sing diresiki paling akeh

Miwiti eksperimen molekuler, kanggo eksperimen sakteruse

Sukses utawa gagal duwe pengaruh sing penting.

Spektrofotometer UV trace / ultra-trace disenengi dening akeh peneliti ilmiah amarga bisa ndeteksi konsentrasi asam nukleat lan residu protein lan ion uyah kanthi gampang, cepet lan ekonomis.

Kaya sing wis dingerteni, A260 tegese nilai OD absorbance asam nukleat, A280 tegese nilai OD absorbance konsentrasi protein, A230 tegese nilai OD absorbance konsentrasi ion uyah, saengga A260 bisa ngowahi konsentrasi asam nukleat, A260/280 tegese residu protein, A260/230 tegese residu ion uyah, nanging iki mung minangka asil pangukuran sing ditemokake dening peneliti.konvensional” kanggo pracaya sing bisa nerangake kemurnian DNA lan RNA kanggoombone tartamtu.Iku ora mung standar kanggo identifikasi asil asam nukleat lan kemurnian, iku mung digunakake minangka referensi, lan iku ora "standar emas".

Manual Thermo Fisher ND-2000 nandheske linuwih asil tes

Alasane yaiku asil sing dipikolehi kanthi nggunakake spektrofotometer UV mikro / ultramikro mung nggambarake asil lan kemurnian asam nukleat saka sisih, lan ana akeh faktor sing mengaruhi (jalur optik, volume sampel, konsentrasi sampel, nilai pH, ion liyane sing mengaruhi pangukuran absorbansi, lan liya-liyane), nilai OD sing diukur ora mesthi akurat.Ing wektu sing padha, amarga lack of specificity saka materi penentuan nilai absorbance, siji-stranded DNA, pindho terdampar DNA, RNA, dNTPs, lan sawetara protein kabeh duwe puncak panyerepan ing 260nm dawa gelombang, lan konsentrasi ditemtokake dening A260 piyambak ora kudu DNA nyata utawa RNA.Konsentrasi, lan integritas lan degradasi ora bisa diadili.

Dadi kepiye carane ngadili kualitas asam nukleat sing diresiki?Saliyane nggunakake spektrofotometer UV mikro/ultramikro kanggo deteksi, cara kayata elektroforesis gel agarose uga dibutuhake kanggo nampilake kemurnian lan integritas asam nukleat kanthi visual, lan kanggo nunjukake konsentrasi ing tingkat tartamtu.Kanthi cara iki, asil asam nukleat lan kemurnian sing dipikolehi saka asil deteksi macem-macem cara bisa dipercaya.

Perbandingan grafik eksperimen

DNA genomik sel H1299 diekstraksi nggunakake kit Ekstraksi DNA perusahaan A, lan katon kontaminasi najis sing signifikan, nyebabake nilai OD sing dhuwur.

(Nilai pangukuran OD lan electropherogram sing cocog)

Indeks evaluasi

Apa ana "standar emas" kanggo ngasilake asam nukleat lan tes kualitas?

Kaya sing kita ngerteni, ora ana cara sing gampang, cepet lan murah.Apa iku spektrofotometer, elektroforesis gel, utawa spektrometri massa, kabeh padha nggambarake konsentrasi lan kemurnian asam nukleat ing solusi saka macem-macem aspek, lan padha kudu diadili dening referring kanggo saben liyane.

Indeks evaluasi paling apik tansahaplikasi eksperimen tindak lanjut.Ora mengaruhi efisiensi transkripsi terbalik lan amplifikasi PCR.Entuk produk amplifikasi sing dipercaya lan nilai Ct, lan entuk urutan lengkap kanthi urutan minangka ekstraksi asam nukleat sing sukses.

Kanggo nyimpulake, tampilan teori rasio mung kudu ditantang dening tampilan "nggunakake asil eksperimen hilir sing apik minangka paramèter ekstraksi sing apik"!

Kit ekstraksi RNA DNA Foregene sing disaranake kanggo entuk kemurnian DNA/RNA sing dhuwur:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/