• facebook
  • linkedin
  • youtube

Nggawe SOP eksperimen PCR kanggo standarisasi prilaku personel eksperimen.

4.1

Eksperimen kanthi ketat netepi prosedur operasi, lan nyuda polusi PCR sing bisa disebabake dening faktor manungsa utawa nyegah kedadeyan polusi.Kajaba iku, eksperimen kudu duwe kawruh lan katrampilan profesional sing cocog, kalebu keahlian ing operasi peralatan sing gegandhengan, njlentrehake kabeh proses kerja, nguwasani metode perawatan kontaminasi lan metode kontrol kualitas laboratorium, lan bisa nerjemahake asil tes kanthi bener.

Nggawe laboratorium PCR standar.

4.2

Laboratorium PCR dipérang dadi papat wilayah ing prinsip, yaiku area persiapan reagen, area pangolahan sampel, area amplifikasi, lan area analisis produk amplifikasi.Rong area pisanan yaiku area pra-amplifikasi, lan rong wilayah pungkasan minangka area pasca amplifikasi.Zona pra-amplifikasi lan zona pasca amplifikasi kudu dipisahake kanthi ketat.Bahan eksperimen, reagen, kertas rekaman, pulpen, bahan pembersih, lan liya-liyane, mung bisa mili saka area pra-amplifikasi menyang area pasca amplifikasi, yaiku, saka area persiapan reagen → area pangolahan sampel → area amplifikasi → area analisis produk amplifikasi, lan ora kudu mili mundur.Aliran udara ing laboratorium uga kudu mili saka area pra-amplifikasi menyang area pasca amplifikasi, lan ora mili mundur.Desain laboratorium PCR sing cocog ditampilake ing ngisor iki:

4.3

Figure A: Mode persiyapan laboratorium PCR becik karo tekanan negatif ing kamar buffer

4.4

Gambar B: Mode persiyapan laboratorium PCR becik kanthi tekanan positif ing ruang buffer

Diagram persiyapan laboratorium PCR sing diwenehake ing Gambar A lan Gambar B kudu dadi mode persiyapan sing luwih becik, lan laboratorium kanthi kondisi bisa ngrujuk menyang mode iki kanggo desain.Kanggo laboratorium biasa, dianjurake supaya area amplifikasi PCR lan area analisis produk bisa dipisahake, lan bukaan tutup kudu dikurangi sabisa ing area persiapan sampel lan area amplifikasi PCR.Elinga: Produk lan pasokan eksperimen ing area analisis produk dilarang banget digawa menyang area persiapan sampel lan area amplifikasi PCR.

4.5

Yen laboratorium mung nindakake deteksi lan identifikasi PCR, disaranake nggunakake PCR kuantitatif fluoresensi tinimbang PCR konvensional.

Hasil deteksi PCR kuantitatif fluoresensi bisa diklumpukake lan dianalisis kanthi sinyal fluoresensi, mula ora perlu mbukak tutup kanggo elektroforesis sawise reaksi, sing ngindhari kontaminasi produk PCR sing disebabake dening bocor produk reaksi kanggo mbentuk aerosol.Yen sampeyan nambahake jumlah bukaan tutup sajrone langkah loading elektroforesis gel, kontaminasi aerosol bisa uga kedadeyan.Disaranake kanggo ningkataké aplikasi PCR kuantitatif lan mboko sithik ngganti PCR kualitatif.

Sistem kontaminasi produk anti-PCR UNG digunakake kanggo reaksi PCR.

Sistem nggunakake dUTP tinimbang dTTP.Sawise reaksi PCR, kabeh produk PCR (fragmen DNA) digabung karo dUTP;ing babak reaksi PCR sabanjure, enzim UNG sing ditambahake ing sistem kasebut diinkubasi ing 37 ° C kanggo 5 menit sadurunge PCR, sing bisa ngrusak kabeh fragmen DNA sing ngemot dUTP, banjur nindakake reaksi PCR.Iki bisa ngilangi kontaminasi aerosol sing disebabake dening produk PCR.Efek kasebut ditampilake ing gambar ing ngisor iki:

4.6

Cathetan: Kanggo seri PCR langsung, sampeyan bisa milih produk seri saka sistem kontaminasi produk anti-PCR ForegeneNyaranake

Kanggo laboratorium sing nganakake tes genotip skala gedhe, disaranake nggunakake sistem kontaminasi produk anti-PCR UNG kanggo nguji reagen saliyane kanggo mbangun laboratorium sing cukup.

Pangeling: Panggunaan sistem iki ora bisa mbusak kontaminasi produk PCR sing wis disebabake.Mula, sistem UNG kudu digunakake ing wiwitan tes sing cocog, lan sistem UNG kudu digunakake kanggo amplifikasi PCR, supaya bisa nyegah kontaminasi produk PCR positif Palsu.

Disaranake nggunakake sistem Direct PCR-UNG saka Foregene nalika nganakake tes skala gedhe, kayata:

Kit PCR Langsung Daun Tanaman-UNG;

Kit PCR Langsung Biji Tanaman-UNG;

Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG;

Kit PCR Langsung Ekor Tikus-UNG;

Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.

Iki seri kit saka Foregeneora mung bisa nindakake deteksi PCR kanthi cepet lan kanthi skala gedhe, nanging uga bisa nyegah lan ngontrol kontaminasi produk PCR kanthi efektif.


Wektu kirim: Mar-19-2021