Ing ngisor iki analisis saka masalah bisa ingBuccalswab/FTA card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

Kolom pemurnian macet

Ing kit iki, ing operasi ekstraksi DNA genomik, kolom pemurnian langsung adsorbed ing sampel campuran lysis enzimatik tanpa langkah centrifugation, lan kolom pemurnian bisa diblokir amarga enzymization pepak lan viskositas dhuwur saka sampel.

Penyebab sing bisa ditindakake yaiku:

1. Pencernaan enzimatik sing ora lengkap saka sampel jaringan.

Rekomendasi: Wektu pangolahan sampel Foregene Protease bisa ditambah kanthi tepat utawa supernatan bisa dijupuk sawise sentrifugasi ing 12.000 rpm (~ 13.400).× g) kanggo 5 menit.

2. Kakehan nggunakake sampel jaringan utawa jaringan gedhe.

Rekomendasi: Luwih becik ora ngluwihi 1Buccal swab ing sampel;yen sampel gedhe banget, nambah dosis saka Buffer ST1, Foregene Protease, buffer ST2 patut.

3. Viskositas sampel dhuwur banget.

Rekomendasi: Sampel bisa diencerake kanthi tepat karo 10 mM Tris-HCl sadurunge ekstraksi DNA genom.

4. Pecahan kertu getih wis disedot.

Rekomendasi: Wektu sentrifugasi transien langkah 6 ekstraksi genom titik getih (Kartu FTA) bisa ditambahi kanthi tepat.

Ngasilake kurang utawa ora ana DNA

Asring ana macem-macem faktor sing mengaruhi ngasilake DNA genom, kalebu asal sampel, kondisi panyimpenan sampel, persiapan sampel, manipulasi, lsp.

DNA genom ora bisa dipikolehi sajrone ekstraksi

Penyebab sing bisa ditindakake yaiku:

1. Pengawetan sampel utawa panyimpenan sing ora bener bisa nyebabake degradasi DNA genomik.

Rekomendasi: Swab oral luwih apik kanggo sampel anyar, lan ora dianjurake nggunakake swab sing diawetake kanggo operasi ekstraksi DNA genomik;sampel titik getih kudu mesthekake yen kualitas qualified lan wektu panyimpenan ngirim ora dawa banget.

2. Panggunaan jaringan sing sithik banget bisa nyebabake ora ana ekstraksi DNA genom sing cocog.

Rekomendasi: Tindakakebukl instruksi sampling swab ing pandhuan operasi, lan ngilangke kaping pirang-pirang supaya sel sing cukup bisa dipasang ing swab lisan kanggo ekstraksi DNA genom;kanggo ekstraksi sampel titik getih, area pemotongan titik getih bisa ditambah kanthi tepat.

3. Foregene Protease ora dijaga kanthi bener, nyebabake nyuda aktivitas utawa inaktivasi.

Rekomendasi: Konfirmasi kahanan panyimpenan sakaing Foregene Protease utawa ngganti karo Foregene Protease anyar kanggo reaksi enzimatik.

4. Pengawetan sing ora bener saka kit utawa wektu panyimpenan dawa banget, nyebabake kegagalan sawetara komponen ing kit.

Rekomendasi: Tuku anyarBuccal swab DNAisolasi kit kanggo tata cara related.

5. Buffer WB ora nambah etanol mutlak.

Rekomendasi: Konfirmasi yen buffer WB nambahake volume etanol absolut sing bener.

6. Eluent ora ditambahake kanthi bener menyang film silikon.

Rekomendasi: Tambah 65°Celuent sing wis digawe panas mudhun menyang tengah membran silikon lan ninggalake ing suhu kamar nganti 5 menit kanggo nambah efisiensi elusi.

LDNA genomik ow-yield diisolasi

Penyebab sing bisa ditindakake yaiku:

1. Pengawetan sampel utawa panyimpenan sing ora bener bisa nyebabake degradasi DNA genomik.

Rekomendasi: Swab oral luwih disenengi sampel anyar, lan swab sing diawetake ora bisa digunakake kanggo ekstraksi DNA genom.

2. Yen jumlah sampel jaringan cilik banget, isi DNA genom sing diekstrak bakal kurang.

Rekomendasi: Tindakake pandhuan sampling swab lisan ing pandhuan operasi, usap kaping pirang-pirang supaya sel sing cukup bisa dipasang ing swab lisan kanggo ekstraksi DNA genom.

3. Foregene Protease ora dijaga kanthi bener, nyebabake nyuda aktivitas utawa inaktivasi.

Rekomendasi: Konfirmasi kahanan panyimpenan sakathe Foregene Protease utawa ngganti karo anyar Foregene Protease kanggo reaksi enzimatik.

4. Masalah eluent.

Rekomendasi: Gunakake Buffer EB kanggo elusi;yen nganggo ddH₂O utawa eluen liyane, konfirmasi yen pH eluate ana ing antarane 7.0-8.5.

5. eluate ora bener ditambahake dropwise.

Rekomendasi: Tambah tetes eluent menyang tengah membran silikon lan ninggalake ing suhu kamar nganti 5 menit kanggo nambah efisiensi elusi.

6. Cairan elusi akumulasi sithik banget.

Rekomendasi: Gunakake eluen kanggo elusi DNA genom kaya sing dibutuhake ing pandhuan, paling oraora kurang saka 15μl.

Low kemurnian of DNA genomdiisolasi

Kemurnian DNA genomik sing kurang bisa nyebabake kegagalan utawa asil eksperimen hilir sing ora nyenengake, kayata: enzim ora bisa dibukak, PCR ora bisa entuk fragmen gen sing dikarepake, lsp.

Penyebab sing bisa ditindakake yaiku:

1. Heteroprotein polusi, RNA polusi.

Analisis: Kolom pemurnian ora dicuci nganggo Buffer PW;kolom pemurnian wisuh Buffer PW ora sakabeheng nggunakake kacepetan centrifugal bener.

Rekomendasi: Priksa manawa ora ana udan ing supernatant sadurunge nambah etanol;manawa kanggo wisuh kolom dimurnèkaké miturut pandhuan, lan langkah iki ora bisa tilar.

2. Impurity polusi ion.

Analisis: Kolom pemurnian buffer WB diilangi utawa mung dicuci sapisan, nyebabake kontaminasi ionik sisa.

Rekomendasi: Aja manawa kanggo wisuh Buffer WB 2 kaping minangka diarahake kanggo mbusak ion residual sabisa.

3. Kontaminasi enzim RNA.

Analisis: RNases manca ditambahake menyang buffer;Operasi cuci buffer PW ora bener, nyebabake residu RNase, mengaruhi operasi eksperimen RNA hilir, kayata transkripsi in vitro.

Rekomendasi: Asam nukleat seri ForegeneisolaKit bisa mbusak RNA tanpa tambahan RNase,mangkono Swab buccal / Kit Isolasi DNA Kartu FTAperlu't nambah RNase;dadi manawa kanggo tindakake pandhuan kanggo kolom dimurnèkaké ngumbah Buffer PW, lan langkah iki ora bisa tilar.

4. Sisa etanol.

Analisis: Buffer WB ora nindakake sentrifugasi tabung kosong sawise ngumbah kolom pemurnian.

Rekomendasi: Nindakake operasi centrifugation tabung kosong sing bener miturut pandhuane.

5. Polusi impurity liyane.

Analisis: Sampel sing disimpen utawa conto khusus ora diolah sadurunge.

Rekomendasi: Sak tenane pretreat sampel minangka prentah.