Pambuka:

RNA, jeneng ilmiah asam ribonukleat, singkatan saka Asam RiboNukleat, yaiku jinis asam nukleat sing dibentuk kanthi nyambungake paling ora puluhan ribonukleotida liwat ikatan fosfodiester.

Premis kanggo njelajah RNA yaiku ngekstrak RNA Total sing bebas polusi, lan prinsip dhasar ekstraksi RNA bisa diringkes kaya ing ngisor iki:

1. Ngganggu sel dhisik

2. Banjur mbusak impurities makromolekul (protein, lipid, DNA, etc.)

3. Pungkasan, RNA wis precipitated nalika mbusak uyah lan pelarut organik, lan luwih ngresiki RNA

Cara ekstraksi kepungkur lan saiki

Cara ekstraksi RNA generasi pisanan yaiku metode presipitasi TRIzol (reagen sing digunakake kalebu guanidine isothiocyanate, fenol, kloroform, lan liya-liyane) sing diciptakake dening mbah kakung sing jenenge Piotr Chomczynski lan mbah Nicoletta Sacchi, amarga penemuan iki ngidini riset ekstraksi RNA Cepet lan gampang, wiwit wiwitan RNA munggah.

Banjur, Eyang kakung ngedol paten iki menyang Invitrogen, lan Invitrogen promosiake metode iki menyang jagad lan dadi metode sing akeh digunakake.

Mengko, Invitrogen dituku dening Thermo!

Produk perwakilan: Reagen TRIzol Invitrogen

Nanging, cara presipitasi TRIzol mbutuhake pirang-pirang udan lan ekstraksi RNA, lan reagen sing digunakake beracun lan butuh wektu suwe kanggo operate.

Mulane, cara pemurnian kolom-enzim generasi kapindho teka, nggunakake membran silika gel minangka bahan adsorpsi asam nukleat khusus kanggo nggedhekake pemulihan RNA ing sampel nalika mbusak impurities liyane.

Cara generasi kapindho nyederhanakake operasi kanthi basis kinerja sing stabil, nyuda faktor risiko, lan nambah efisiensi ekstraksi RNA.

Produk perwakilan: QIAGEN RNeasy lan paling produk domestik

Nanging, loro cara generasi pisanan lan kaloro mbutuhake nggunakake DNase kanggo mbusak kontaminasi DNA, kang ndadekke sawetara ora nyaman kanggo eksperimen hilir sakteruse.Sisa DNase bakal nyuda efisiensi transkripsi mbalikke lan nyuda sintesis cDNA untai pertama, saengga bisa mengaruhi akurasi asil.

Mulane, metode ekstraksi generasi katelu dioptimalake kanthi basis generasi kapindho.Eksperimen ora perlu nambah enzim, lan RNA bisa gampang dipikolehi mung kanthi rong kolom.

Kolom 1: Kolom Pembersihan DNA kanggo ngresiki DNA

Kolom 2: Kolom mung RNA khusus nyerap lan mbalekake RNA

Operasi sing prasaja kasebut ora mung ngirit wektu, nanging uga nggampangake operasi eksperimen hilir!

produk wakil: QIAGEN RNeasy Plus lanForegeneProduk seri purifikasi RNA

(RNeasy Plus)

(Foregene kangKit Isolasi RNA Total Tumbuhan）

Ngomong kanthi tenang!Kit RNA Foregene uga nyedhiyakake RNase Eraser sing gampang digunakake, sing bisa ngilangi 400μg RNase ing permukaan padhet sajrone 1 menit, tanpa nambahake zat beracun ing awak manungsa!

Pic1: Bagan perbandingan proses operasional

Produk Foregene bisa ngrampungake ekstraksi RNA mung ing rong lagu, aja nggawe wong liya iri karo kemajuan eksperimen sampeyan!

Pic2:Easil eksperimen grafik perbandingan

Generasi pisanan (1: TRIzol)

Generasi kapindho (2: RNeasy of QIAGEN)

Generasi katelu (3: QIAGEN's RNeasy plus, 4: Foregene)

Pic3: Grafik qPCR (grafik kurva amplifikasi)

Generasi pisanan (ijo tegese TRIzol -, abang tegese TRIzol +)

Generasi kapindho (biru langit tegese QIAGEN RNeasy-, abang tegese QIAGEN RNeasy +)

Generasi katelu (biru tegese QIAGEN RNeasy plus, ijo tegese Foregene)

(Cathetan: grafik qPCR "-" nuduhake yen DNase durung ditambahake lan kontaminasi DNA durung dibusak. Mulane, CT luwih dhuwur lan asile ora akurat; "+" nuduhake yen DNase wis ditambahake lan kontaminasi DNA wis dibusak, asile akurat)

Saben upgrade teknis tegese operasi eksperimen berkembang kanthi arah sing luwih gampang lan luwih gampang digunakake.

Foregene duwe tujuan kanggo mbantu luwih akeh peneliti ilmiah ngirit wektu lan biaya eksperimen, entuk asil eksperimen sing bermutu, lan bebarengan nggawe prestasi riset ilmiah sing luwih larang.